流式细胞术知识分享 — 应用篇
流式细胞术在过去30年里得到迅速发展,在免疫学、分子生物学、细菌学、病毒学、癌症生物学和传染病学等领域得到广泛应用。本文将主要以免疫学和分子生物学为例,介绍流式细胞术在实际中的应用。
流式细胞术在过去30年里得到迅速发展,在免疫学、分子生物学、细菌学、病毒学、癌症生物学和传染病学等领域得到广泛应用。本文将主要以免疫学和分子生物学为例,介绍流式细胞术在实际中的应用。
竞争法ELISA(也称抑制或封闭法ELISA)通过定量某种样品分析物对预计信号的干扰,来测定该分析物在样品中的含量,可通过以下方式进行:微孔板用一种分析物或一种对靶标分析物具有特异性的抗体包被(即直接法和间接法),再添加一种有部分某种检测的靶标分析物,以竞争结合抗体上的位点。信号与分析物含量呈负相关,因此,如果靶标分析物的浓度较分析物高,靶标分析物竞争性结合有限量的标记抗体,参考信号将会较靶标分析…
在流式细胞术中会使用多种荧光试剂,包括荧光偶联抗体、DNA结合染料、活性染料、离子指示剂染料和荧光蛋白。由于相关试剂种类和数量的增加,用于流式细胞术实验的参数数量发生了爆炸性增长。本文就为大家介绍一下常用的流式荧光试剂。
流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源,照射在细胞上,产生散射光和荧光信号,由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。本文将为大家简单介绍几种流式细胞仪。
检测细胞周期常用的方法是检测DNA含量,可以选择能与DNA结合的荧光染料(如PI等),再根据细胞各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。
细胞凋亡apoptosis是机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下,通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡(programmed cell death)。 细胞凋亡是一种基本生物学现象,不仅可以去除生物体中不重要的细胞和组织,确保生物体正常生长和发育,还能破坏被病毒感染以及DNA受损的细胞,减小它们对生物体的损害。细胞凋亡在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作…
包裹一 样本如何处理、收集、保存? 1.细胞培养上清 细胞培养液在2500rpm/min 离心20分钟后,收集上清即刻检测, 或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 2.血清样本 分离管分离血清。在1000g离心之前,使血样凝集30分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。 3. 血浆样本 EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集3分钟内离心收集样本。即刻检…