单细胞悬液制备 1. 细胞 材料： 消化酶、流式染色缓冲液（推荐目录号70-S1001）、流式管 操作过程： 悬浮细胞：离心收集细胞，去除上清，用流式染色缓冲液重悬细胞，达到细胞终浓度为2x105-106/mL。 贴壁细胞：用合适的酶消化细胞，（推荐）加入含血清的PBS或者含血清的细胞培养基终止蛋白酶反应，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用，防止酶破坏细胞抗原表位，推荐Accutase酶消化细胞…

流式细胞术的应用颇为广泛，利用两种检测信号可实现对细胞大小、颗粒度及内部结构（如细胞器）、细胞状态（凋亡/周期）、细胞内离子（Ca2+、pH、ROS）、细胞表型等的检测分析。

流式细胞术（flow cytometry, FCM）是当代最先进的细胞分析技术之一，包括各种细胞的计数、细胞中抗原分子的检测、细胞中DNA和RNA的倍体分析、细胞的生物学特性及功能分析等。在血液学检测中，应用FCM分析的样本多为外周血、骨髓、各类体液（如脑脊液、胸水、腹水）以及人体的组织（如淋巴结、脾、肝等），下面我们将介绍这几种常见样本的制备方法，样本制备的好坏对最终的检测结果有很大影响。 外周…

上一期我们讲到流式实验的三大要素是样本（细胞或颗粒）、流式细胞仪和荧光素偶联抗体，进而讲到了荧光素的选择问题，本期让我们回过头来了解了解常见荧光素的特点。荧光素按激发光波长来分，主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类，其中，常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素，如FITC、PE、APC、PI等。 激发波长为488 nm的荧光素 1. 异硫氰酸荧…

细胞样本 取100ul细胞悬液（细胞计数后用流式染色缓冲液 Flow Cytometry Staining Buffer调整浓度为1×107/mL） 加入适量的表面抗体，室温避光孵育15min（抗体用量和孵育条件详见抗体说明书） 加入1~2ml流式染色缓冲液，300g离心5min弃上清 用 500ul 流式染色缓冲液重悬细胞，上机检测并分析如不能立即检测，用0.5ml 0.1~4%多聚…